Рис. 2. Хроматограмма фронтального метода.

Фронтальный метод применяется редко. Его используют для очистки раствора от примесей, если они сорбируются лучше, чем основной компонент. В вытеснительном методе, после введения в колонку смеси, ее компоненты, А, В, С,D и т.д., разделяют слабоактив-ным элюентом (S), который затем заменяют на другой (вытеснитель), сорбирующийся НФ лучше, чем любой из компонентов анализируемой смеси.

Вследствие этого новый элюент вытесняет компоненты, которые выходят из колонки в порядке возрастания взаимодействия с НФ. Выходная кривая этого метода имеет вид, показанный на рис. 2.

При некоторых условиях длина ступени на этой хроматограмме пропорциональна концентрации, что используется в количественном анализе. В вытеснительном методе, в отличие элюентного, концентрация раствора при хроматографировании не уменьшается. Существенным недостатком вытеснительного метода является частое наложение зоны одного вещества на зону другого, поскольку зоны компонентов в вытеснительном методе не разделены зоной растворителя.

Рис. 3. Хроматограмма вытеснительного метода.

При проявительном (элюентном) методе в колонку в виде раствора или газа вводят небольшую порцию смеси, содержащей компоненты А и В и промывают колонку растворителем, называемым элюентом.

По мере прохождения элюента через колонку вещества перемещаются с ним с разной скоростью, зависящей от сродства к сорбенту. В результате компоненты смеси разделяются на зоны. Эти зоны поочередно выходят из колонки, разделенные зонами чистого элюента. Фиксируя аналитический сигнал, связанный с концентрацией компонентов смеси. На выходе из колонки получают элюентную хроматограмму (рис. 3), состоящую из ряда пиков, каждый из которых соответствует отдельным компонентам смеси. Чем больше концентрация компонента, тем больше его пик, что является основой количественного анализа. Проявительный метод дает возможность разделять сложные смеси.

Рис. 4. Хроматограмма элюентного метода.

В случае разделения этим методом смеси, состоящей из окрашенных компонентов, в прозрачной колонке можно видеть зоны распределившихся вдоль сорбента компонентов. Сорбент с зонами называют внутренней хроматограммой (рис. 4). Она позволяет судить о качественном составе смеси.

Рис. 5. Вид внутренней хроматограммы.

Первая внутренняя хроматограмма была получена в 1903 году ботаником М.С. Цветом. На колонке, заполненной карбонатом кальция (НФ), он разделил хлорофил на ряд различно окрашенных компонентов, используя в качестве ПФ петролейный эфир. Благодаря открытому им способу разделения сложных смесей веществ Цвет считается родоначальником физико-химического метода, которому он дал название хроматография (от греческого - "цветопись"). Из всех видов хроматографии наибольшее значение имеет элюентная колоночная хроматография. Основными ее характеристиками являются коэффициенты емкости, разделения, распределения, время удерживания, а также ширина и разрешение пиков. Коэффициент емкости К показывает, насколько сильно вещество А удерживается НФ по сравнению с ПФ: , где n - число молей вещества А в подвижной и неподвижной фазах.

Коэффициент распределения показывает соотношение концентраций вещества А в НФ и ПФ, при котором при распределении вещества А между ПФ и НФ устанавливается равновесие .

Для каждого вида хроматографии коэффициент распределения имеет свое название: в распределительной и ионообменной - коэффициент распределения, в адсорбционной - коэффициент адсорбции, в гельпроникающей - коэффициент проницаемости.